规 模 化 猪 场 猪 瘟 的 净 化 与 防 制

规 模 化 猪 场 猪 瘟 的 净 化 与 防 制猪瘟（Ｃｌａｓｓｉｃａｌ ｓｗｉｎｅ ｆｅｖｅｒ， ＣＳＦ） 是由黄病毒科瘟病毒属的猪瘟病毒感染引起， 是当前我国规模化猪场的主要传染病之一， 也是需要重点防控的重要传染病。根据２００５年５月中华人民共和国农业部令第５３号《动物病原微生物分类名录》， 猪瘟病毒分类于二类动物病原微生物， 属高致病性病原。值得注意的是， 虽然规模化猪场典型急性猪瘟大面积流行已不常见， 但猪瘟的发生尤其是非典型猪瘟仍然普遍存在， 而且由于诊断技术的缺陷往往造成对猪瘟疫情的忽视与误判。本文将介绍在规模化猪场的工作实践中猪瘟净化的必要性、有利条件以及净化策略。１ 规模化猪场猪瘟的净化１．１ 猪场 分别为我国北方（ 河北 Ａ）、中部（ 河南 Ｂ） 以及南方（ 江西 Ｃ）３ 个规模化种猪场， 地理条件和隔离措施良好， 饲养管理正规， 消毒措施严格， 基础母猪都在 ６００ 头以上， 自繁自养。１．２ 操作方法 分别用扁桃体活体采样法采取种猪扁桃体样品。在 １～２ ｄ 内对整条生产线采样， ２４ ｈ 内低温送实验室进行检测， 在实验室做成触片， 采用猪瘟荧光抗体（ 购自中国兽药监察所） 染色检测猪瘟病毒抗原，１～２ ｄ 内检测完毕， 在检测报告送达 １～２ ｄ 内一次性淘汰所有阳性猪。然后对整个繁殖群普遍免疫 １ 次猪瘟弱毒组织苗（ 成兔脾淋苗，２ 头份／头）， 以后每次所留后备猪都进行扁桃体活体检测， 阳性者不得作为种用。１．３ 初步净化结果 ３ 个猪场猪瘟净化与检测结果如表 １ 所示， 河北 Ａ 猪场净化半年后检测， 阳性率下降 ７０．０９％， 统计学分析（χ２ 检验， ＳＰＳＳ 软件） 表明， 猪瘟带毒率明显下降（Ｐ＜０．０１）。同时， 通过净化， 猪场的生产指标明显提高， 母猪分娩率提高 ０．８％， 产活仔率提高４％， 窝均产活仔增加 １．３ 头， 全期死亡率下降１３．６％。河南Ｂ猪场间隔 ５个月 ２ 次检测， 种猪猪瘟病毒阳性率下降 ８３．３０％（Ｐ＜０．０１）， 第 １ 次检测淘汰后平均窝产健康仔猪由 ９．２８ 头提高到 ９．５６ 头， 生长猪成活率由 ８１．４％提高到 ８３．９％。在江西 Ｃ 规模化猪场， 笔者首先对整个繁殖群免疫 １ 次猪瘟弱毒组织苗（ 成兔脾淋苗， ２ 头份 ／头）， 然后对繁殖障碍猪群进行检测与淘汰。第 ２ 次对全群进行检测， 结果猪群阳性率下降 ９０．２０％（Ｐ＜０．０１）， 同样淘汰阳性带毒种猪。在进行猪瘟净化的同时， 以 ｇＥ－ ＥＬＩＳＡ 监测结果对猪群进行了伪狂犬病的净化， 并对猪繁殖与呼吸综合征（ＰＲＲＳ）采取针对性的防控措施。在很短的时间内， 繁殖群生产性能得到大幅度提高， 窝均产活仔数由 ５．２ 头提高到９．２头， 产死、残、弱仔比例由４９．５０％降至１０．４４％， 猪场生产效益得到极大提高。以上３个规模化猪场猪瘟的净化实践表明， 在规模化猪场采用“检测与淘汰”策略是控制猪瘟的有力措施。２ 猪瘟净化的必要性２．１ 猪瘟疫情在我国仍然普遍存在由于猪瘟兔化弱毒疫苗的广泛应用， 有效地控制了猪瘟的大面积流行， 但是现阶段猪瘟疫情仍然普遍存在。刘有昌等使用美国 ＩＤＥＸＸ 公司生产的猪瘟病毒检测 ＥＬＩＳＡ 试剂盒， 于 ２００５ 年 １～８ 月对河北、天津、北京、辽宁、内蒙古等地 １０个猪场送检的６００ 多份种公、母猪血液样品进行猪瘟病毒检测发现， １０个猪场都存在带毒种猪， 各猪场除可疑猪外阳性率为 ３％～７０％， 在 １０％～２０％的较多， 平均达２０．５％［１］。中国兽医药品监察所丘惠深研究员等近年来对我国 １３个省、市 ２９个大、中型猪场的种猪进行了检测，扁桃体猪瘟荧光抗体染色技术结果显示，所有被检猪场都存在种猪猪瘟带毒， 全国种猪猪瘟抗原阳性率平均为 １１．１２％， 最高的可达 ３０．７％，最低为 ４．４％［２］。卫秀余等利用酶标的方法于 ２００４ 年对 ２３４ 个猪场的送检样品进行猪瘟抗原检测， 结果阳性 ６４ 个， 阳性率达 ２７．４％； 而同时采用间接血凝方法对４７３５份血清检测， 结果合格率仅为 ６９．１％［３］。笔者于 ２００５ 年对北方部分规模化猪场种猪带毒情况进行调查， 结果发现， 种猪带毒率为 ５％～２０％。此外，６５％猪场弱仔以及保育猪猪瘟抗原临床上监测结果也呈现阳性［４］。说明我国猪场的母猪带毒现象是相当普遍的， 只是程度不同， 所以猪瘟仍然是现阶段规模化猪场必须重视的重要疫病。２．２ 猪瘟的发生表现为种猪的繁殖障碍以及温和型特点由于免疫水平低下、低毒力猪瘟病毒常在或其它原因， 导致猪瘟病毒在种猪群形成持续感染， 猪瘟病毒在猪体内长期存在， 即可同时检测到猪瘟病毒抗体和抗原， 只有通过实验室方法， 才能检测出带毒猪。持续感染种猪表现为妊娠母猪带毒综合征和公 猪精液传播， 这是猪群中猪瘟疫情持续存在的根本原因。在临床上种猪除可能出现繁殖障碍外， 往往不表现明显的临床症状。但是， 繁殖母猪可能出现流产和产死胎、木乃伊胎及弱仔， 仔猪的先天性感染往往形成免疫耐受［５］。临床上经常发现， 部分种猪猪瘟病毒抗体及其它病原抗体水平极低， 但是抗原检测结果为阳性。如果带毒后备猪进入生产群， 则会在猪场形成猪瘟的恶性循环链， 因此要从源头上控制规模化猪场的猪瘟疫情， 则必须对种猪群进行净化［２］。２．３ 规模化猪场猪瘟往往与其它疾病发生混合感染 近年来， 随着规模化养猪业的发展， 一些免疫抑制性传染病病原如猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒２型给养猪生产带来极大的危害， 猪瘟病毒通常与这些病原形成混合感染，一方面加重了猪瘟的危害性，另一方面给确诊带来了困难。这就需要采取实验室方法鉴定病原的种类， 对特定的猪群进行具体分析，客观科学地分析疫情，在进行猪瘟净化的同时不可忽视其它病原的危害，采取综合防制措施。３ 净化猪瘟的有利条件３．１ 便利的活体采样技术由于带毒种猪是猪场猪瘟病毒持续存在的根本原因， 因此，对种猪采取“检测与淘汰”策略可以从源头上对猪瘟进行净化。目前， 国内已有专用的猪扁桃体活体采样器械， 可以非常便利对种猪进行活体采样（图 １）。该方法简单易学， 每头猪钩取扁桃体样品约 ３０ ｍｇ， 置于低温保存， 然后送有条件的实验室采用免疫荧光或 ＰＣＲ 方法检测猪瘟病毒抗原。需要注意的是采样部位必须准确， 同时， 每头猪采样后应及时消毒处理， 消毒剂一般可采用 ２％～３％氢氧化钠或酚类消毒剂。３．２ 高效、经济的猪瘟抗原抗体检测方法 必须指出的是， 目前一些猪场仅凭借抗体检测结果来监测猪瘟病毒， 甚至根据抗体效价的高低来对猪瘟进行诊断。实验室和临床实践表明， 抗体检测诊断存在较大的误区， 因为到目前为止， 现有的血清学方法还无法区分疫苗抗体和野毒抗体。因此仅凭借抗体效价高低来对猪瘟进行诊断， 结果往往不确定。所以， 猪瘟病毒持续感染种猪的检测必须侧重于病毒抗原的检测［６］。其中猪瘟病毒免疫荧光法为国家标准方法， 也是国际通用方法。通过荧光标记的抗体直接测定猪瘟病毒抗原， 带毒猪扁桃体隐窝上皮细胞胞浆呈现特异性荧光（ 图 ２）， 由于猪瘟兔化弱毒疫苗不会在猪体内形成持续感染， 因此， 免疫荧光法可以快速有效检测出持续带毒猪［６，７］， 同时也可以批量检测样品， 检测成本相对较低。荧光抗体可从专门的机构订购，但对于结果的判定需要有一定的经验。采用免疫荧光法净化猪瘟已经在一些猪场取得成功，净化后猪瘟疫情得到有效控制［８，９］。检测抗原的 ＥＬＩＳＡ 方法的原理是双抗体夹心法， 以猪瘟病毒血清包被微量反应板， 与被检样品中猪瘟病毒抗原结合， 然后与猪瘟病毒特异的单克隆抗体形成夹心的上层， 采用辣根过氧化物酶检测，底物的吸光度与病毒抗原含量成正比。猪瘟病毒抗体检测方法包括 ＥＬＩＳＡ 以及间接血凝方法。ＥＬＩＳＡ 方法由于测定试剂和方法的标准化， 试验结果可以定量， 同时可以高通量检测样品，也逐渐被用于临床监测。但由于试剂盒大部分为进口， 因而成本相对较高， 样品处理的过程也比较复杂。需要注意的是， 试验检测过程需要严格设立阳性和阴性对照， 对于试验人员的技术要求也比较高。目前在国内测定猪瘟病毒抗体最常用的是间接血凝法， 该方法采用猪瘟病毒致敏红细胞直接测定血清抗体效价， 要求的设备比较简便， 结果判定直观，因而适于基层应用， 根据经验一般以 １∶ １６或 １∶３２作为临界标准。需要注意的是， 抗体效价与保护力之间的关系尚无定论， 而且与其它血清学方法一样， 无法区分野毒抗体和疫苗抗体。但是通过定期的抗体监测可以及时了解猪群的免疫状况， 评价疫苗免疫效果。因而， 定期的抗体监测是猪场猪瘟综合防制措施中必不可少的重要环节。３．３ 合格的猪瘟疫苗猪瘟兔化弱毒疫苗的应用实践表明， 现有的疫苗毒株（Ｃ 株）对于毒力不同的田间毒株仍然具有坚强的保护力，也就是说不用怀疑疫苗毒株的效力。但是， 高效的疫苗毒株并不代表有效的商品疫苗。需要指出的是， 对免疫猪群仍然发生猪瘟的原因要进行具体分析， 种猪带毒和仔猪先天性感染是重要的原因。另外，不同厂家疫苗在生产过程中毒价可能存在一定的差异， 且疫苗在运输、保存、使用过程中措施不当会对疫苗的效果产生影响， 免疫程序不合理也是重要因素， 如母源抗体的干扰。鉴于目前猪瘟的流行现状， 对猪瘟进行净化的猪场仍然需要使用猪瘟疫苗，合格高效的猪瘟兔化弱毒疫苗对于净化猪群可提供有力的保护作用。４ 总结与讨论 实践表明， 猪瘟仍然是当前规模化猪场需要重点防范的传染病， 而持续带毒猪是猪瘟发生过程中的关键因素， 因此，只要从种群上净化生产群， 对种猪采取“检测与淘汰”策略， 将会从源头上控制猪瘟在猪场的恶性循环链。规模化猪场应充分认识猪瘟流行的新特点， 更新观念， 着眼于猪场的长期发展，重点抓好种群的净化，通过对种群２～３次净化，对每批后备猪进行检测， 将显著降低种猪群的阳性率，从而从根本上控制猪瘟疫情。同时要充分认识到，猪瘟的防制是一项系统性的综合工程， 猪场应采取严格的生物安全措施， 控制人员、车辆、器械、治疗工具的机械传播， 加强消毒工作。要采用优质高效的猪瘟疫苗， 定期监测猪瘟抗体水平， 通过定期的监测建立适合本场的免疫程序并严格执行， 规模化猪场还应该建立定期的流行病学监测机制， 及时了解猪群疫病潜伏感染情况。在进行猪瘟净化的同时， 还要加强对猪伪狂犬病、猪繁殖与呼吸综合征以及圆环病毒病等其它危害严重疫病的防制， 条件允许时， 可以对多种疫病同时净化， 真正建立一个健康、稳定的繁殖群， 将极其有效地提高生产效益和增强品牌形象。

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